大仓鼠消化系统中酶的分布研究

材料与方法

1.1  材料

大仓鼠：2018年10月中旬至11月初捕于牡丹江三道关林场。

1.2  方法

1.2.1  样品制备  将大仓鼠胃、大肠、小肠、肝脏4种组织与磷酸缓冲液（m∶V=1∶10）进行混合研磨制成匀浆，然后在4 ℃、8 000 r/min的条件下离心20 min，留上清液4 ℃保存，待测。

1.2.2  电泳方法  采用常规聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法将大仓鼠胃、大肠、小肠、肝脏4种组织中SOD、EST、AMY进行分离分析。

1.2.3  染色方法  SOD、EST、AMY 3种酶的染色参照文献[8]。

2  结果与分析

2.1  SOD电泳结果分析

大仓鼠4种组织SOD电泳谱带分布及电泳迁移率见表1、图1。由表1、图1可知，大仓鼠胃、小肠、大肠、肝脏4种组织共分离出SOD1～SOD11。胃分离出SOD2、SOD5～SOD7，迁移率分别为0.884、0.379～0.265的4条譜带;小肠分离出SOD2、SOD5～SOD8、SOD10～SOD11，迁移率分别为0.884、0.379～0.091、0.030～0.023的7条谱带;大肠分离出SOD1、SOD5～SOD8、SOD10～SOD11，迁移率分别为0.909、0.379～0.091、0.030～0.023的7条谱带;肝脏分离出SOD2～SOD9，迁移率分别为0.884～0.038的8条谱带。

大仓鼠4种组织之间SOD酶活性表达强度为肝脏>大肠>小肠>胃，其中SOD5～SOD7为共有谱带，迁移率0.379～0.265，肝脏表达活性最强。SOD1为大肠的特有谱带，迁移率0.909;SOD9为肝脏的特有谱带，迁移率0.038。

2.2  EST电泳结果分析

大仓鼠4种组织EST酶电泳谱带分布及电泳迁移率见图2、表2。由图2、表2可知，大仓鼠胃、小肠、大肠、肝脏4种组织共分离出EST1～EST12。胃分离出EST2～EST5、EST7、EST9～EST12，迁移率分别为0.714～0.679、0.382、0.259～0.188的9条谱带;小肠分离出EST1～EST5、EST7、EST9～EST12，迁移率分别为0.742～0.679、0.382、0.259～0.188的10条谱带;大肠分离出EST2～EST5、EST9～EST12，电泳迁移率分别为0.714～0.679、0.259～0.188的8条谱带;肝脏分离出EST3～EST6、EST8～EST12，电泳迁移率分别为0.696～0.661、0.321～0.188的9条谱带。

大仓鼠4种组织之间SET酶活性表达强度为小肠>肝脏>大肠>胃，其中EST9～EST12和EST3～EST5为共有谱带，迁移率0.259～0.188和0.696～0.679，且小肠表达活性最强。EST1为小肠特有谱带，迁移率0.742;EST6和EST8为肝脏特有谱带，迁移率0.661、0.321。

2.3  AMY电泳结果分析

大仓鼠的4种组织AMY酶电泳谱带分布及电泳迁移率见图3、表3。由图3、表3可知，大仓鼠胃、小肠、大肠、肝脏4种组织共分离出AMY1～AMY8。胃分离出AMY1～AMY8，电泳迁移率为0.565～0.154的9条谱带;小肠分离出AMY5～AMY8，电泳迁移率为0.231～0.154的4条谱带;大肠分离出AMY5～AMY8，电泳迁移率为0.231～0.154的4条谱带;肝脏分离出AMY5～AMY6，电泳迁移率为0.231～0.205的2条谱带。

大仓鼠4种组织之间AMY酶活性表达强度为大肠>小肠>胃>肝脏，其中AMY5～AMY6为共有谱带，迁移率0.231～0.205，大肠活性表达最强。AMY1～AMY4为胃的特有谱带，迁移率0.564～0.496。

3  小结与讨论

SOD是生物机体抗氧化防御的酶，能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，能清除体内产生的自由基。这因为肝脏不但是机体消化腺，能够分泌参与食物消化的酶，还是生物体内最大的解毒组织，保护机体免受超氧阴离子自由基的损伤。大仓鼠4种组织均有SOD分布，肝脏SOD的谱带分布广且SOD活性最强，这与肝脏功能相关。

EST参与生命活动的基础代谢，存在于各种组织中。小肠是机体消化食物和营养吸收的主要场所，大量的酯类化合物在小肠进行水解反应，这需要大量的EST酶进行催化，肝脏在糖类、脂类、蛋白质等物质代谢中起着重要作用。大仓鼠小肠中EST酶的谱带表现出较强的活性，这与小肠的功能相适应。肝脏中EST酶的谱带表达活性较强，而且分离出来的谱带数多于胃和大肠，这与肝脏功能有关。

AMY是以淀粉或糖原为底物。食物进入体内先经过胃的初步分解成可溶性淀粉，再到小肠进行主要的消化和分解。大仓鼠胃分离出的AMY谱带最多，这与胃作为机体消化过程中的重要场所物质代谢旺盛相符。肝脏参与淀粉的消化过程，经肠道消化吸收的單糖到达肝脏转化为肝糖原贮存，本研究小肠和大肠中AMY活性高于肝脏中AMY活性，这与周健恺等[9]关于银鲳不同消化器官中消化酶活性的研究结果不同，但与于洋[10]关于平贝母不同阶段培养体淀粉酶研究结果相同，有待于进一步研究。

SOD、EST、AMY在大仓鼠体内均有表达，4种组织表达强弱不同，但在小肠中均有较强的表达。在4种组织中存在谱带缺失的现象，这些差异是由有关基因表达和调控的差异造成的，酶活性存在的差异与组织的功能相关，显示出4种组织功能及代谢活跃程度。

参考文献：

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[3] 白晓慧.黑尾近红鲌消化酶活性分布及其性质研究[D].武汉：华中农业大学，2007.

[4] 王梅芳，余祥勇，杨荣权.二色裂江珧EST和SOD同工酶组织特异性研究[J].广东海洋大学学报，2000，20（1）：5-8.

[5] 金春华，钟爱华，张海琪，等.大弹涂鱼不同组织组织的同工酶研究[J].海洋科学，2004，28（3）：35-40.

[6] 王振龙，王大伟，张知彬.雄性大仓鼠体重对其斗殴行为及社会等级的作用[J].兽类学报，2007（1）：26-32.

[7] 张建军，梁  虹，张知彬.食物限制对异性大仓鼠气味选择的影响[J].动物学杂志，2003，38（3）：33-37.

[8] 韩  庆，鲁密芳，张建平，等.池蝶蚌与三角帆蚌不同组织SOD及EST酶的比较研究[J].湖北农业科学，2013，52（15）：3615-3618.

[9] 周健恺，徐善良.银鲳不同消化器官中消化酶活性的分布及其比较[J].宁波大学学报（理工版），2014（4）：1-6.

[10] 于  洋.组培平贝母不同阶段培养体淀粉酶电泳及其活力的研究[J].中国农学通报，2010，26（7）：52-54.

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